联系我们Contact us
基本信息
品(pin)系名称：B6.Cg-Tg(tetO- Alb- uPA)1 Vst /Vst
常用名： Tet-uPATg小鼠; Tet-uPA小(xiao)鼠
背景：C57BL/6NCrl
毛(mao)色(se)：黑色(se)
鉴定(ding)方法(fa)：黑(hei)色(se)
品系(xi)建立：
Tet-uPA小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)是(shi)肝脏特异表达的(de)(de)(de)Alb启动(dong)(dong)子(zi)/增强子(zi)驱动(dong)(dong)的(de)(de)(de)rtTA基(ji)(ji)因(yin)和TRE-uPA基(ji)(ji)因(yin)片(pian)段转(zhuan)入(ru)小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)建立的(de)(de)(de)Tet-On调控(kong)的(de)(de)(de)uPA转(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)，在(zai)Dox诱导(dao)(dao)下uPA在(zai)肝脏表达，可(ke)引(yin)起肝损伤（如图1所(suo)示）。维通达建立的(de)(de)(de)Tet-uPA小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)品系是(shi)由混(hun)合背(bei)景的(de)(de)(de)转(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)首建鼠(shu)(shu)与C57BL/6NCRL小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)回交10代获得(de)的(de)(de)(de)。Tet-uPA小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)的(de)(de)(de)优点是(shi)小(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)在(zai)未诱导(dao)(dao)时呈(cheng)健康状(zhuang)态，在(zai)Dox给药诱导(dao)(dao)时才出现肝损伤，而(er)且可(ke)以(yi)通过Dox的(de)(de)(de)剂量控(kong)制肝损伤程度。
2006年(nian)，维通达(da)研(yan)究(jiu)人员(yuan)构建了(le)TRE-uPA 转基因(yin)小鼠(shu)和Alb-rtTA转基因(yin)小鼠(shu)，然后交(jiao)配获(huo)得了(le)Alb-rtTA/TRE-uPA双阳性小鼠(shu)；通过Dox诱(you)导(dao)，在该(gai)小鼠(shu)中检测(ce)到了(le)uPA表(biao)达(da)和肝损伤[1]。维通达(da)技术人员(yuan)将Alb-rtTA/TRE-uPA双阳性小鼠(shu)连续8代回交(jiao)到C57BL/6 NCrl，2018年(nian)获(huo)得Tet-uPA B6小鼠(shu)。
模型特征
图1 uPA基因在肝细胞的(de)可(ke)调控表达。
繁育信息
交配方(fang)式：纯合(he)扩繁
日粮信息：SPF 繁殖鼠粮
平均产子数：6
繁育周(zhou)期(周(zhou))：32
基因型鉴定信息
基因 | 引物 | 序(xu)列(5’---3’) | 产(chan)物大(da)小(xiao) |
uPA | uPA-F | GTCGAGTAGGCGTGTACGGT | 400bp(positive) |
uPA-R | CCATTTCCATGATAGCAGGT | ||
rtTA | rtTA-F | GCTCCAGATGGCAAACATACGC | 640bp(positive) |
rtTA-R | TTCCTCCAATACGCAGCCCAGT |
表型
Tet-uPA B6小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)(shu)，可(ke)以(yi)在(zai)(zai)任何时间(jian)用Dox诱(you)(you)导(dao)肝(gan)损伤(shang)(shang)。此前研(yan)(yan)究(jiu)发(fa)(fa)现，小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)(shu)肝(gan)脏(zang)特(te)异性过表(biao)达尿(niao)激(ji)(ji)酶(mei)型纤(xian)溶酶(mei)原(yuan)激(ji)(ji)活蛋白(urokinase-type plasminogen activator，uPA)可(ke)引起肝(gan)细(xi)胞坏死(si)，即(ji)uPA转(zhuan)基因(yin)小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)(shu)可(ke)以(yi)作(zuo)为(wei)肝(gan)损伤(shang)(shang)模(mo)(mo)型。但是uPA转(zhuan)基因(yin)鼠(shu)(shu)(shu)(shu)的(de)(de)(de)缺点(dian)是死(si)亡(wang)率高，难于(yu)繁(fan)殖。北(bei)京(jing)维通达公司开发(fa)(fa)了可(ke)调控的(de)(de)(de)更(geng)接(jie)近生理性条件(jian)的(de)(de)(de)肝(gan)损伤(shang)(shang)模(mo)(mo)型Tet-uPA转(zhuan)基因(yin)小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)(shu)。这种小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)(shu)转(zhuan)入了两个基因(yin)片段(duan)，一段(duan)是Alb-rtTA，一段(duan)是TRE-uPA，构成在(zai)(zai)肝(gan)细(xi)胞内特(te)异表(biao)达的(de)(de)(de)Tet-On系统调控的(de)(de)(de)uPA转(zhuan)基因(yin)结(jie)构。Tet-uPA小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)(shu)在(zai)(zai)不诱(you)(you)导(dao)的(de)(de)(de)情况下是完全健康状态(tai)，可(ke)以(yi)正常繁(fan)殖；当用四环素类(lei)药(yao)物Dox诱(you)(you)导(dao)时，uPA在(zai)(zai)肝(gan)细(xi)胞内表(biao)达，引起肝(gan)损伤(shang)(shang)。既可(ke)以(yi)用高剂(ji)量(liang)Dox诱(you)(you)导(dao)产(chan)生急性肝(gan)损伤(shang)(shang)甚至肝(gan)衰(shuai)竭的(de)(de)(de)表(biao)型，也可(ke)以(yi)用较低剂(ji)量(liang)持续诱(you)(you)导(dao)成为(wei)慢性肝(gan)损伤(shang)(shang)。在(zai)(zai)合(he)适的(de)(de)(de)时间(jian)窗口诱(you)(you)导(dao)uPA表(biao)达，并结(jie)合(he)高脂饮(yin)食，Tet-uPA小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)(shu)可(ke)以(yi)诱(you)(you)导(dao)成非酒精性脂肪变性肝(gan)炎（non-alcoholic steatohepatitis, NASH）、肝(gan)硬(ying)化和肝(gan)癌模(mo)(mo)型。因(yin)而Tet-uPA小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)(shu)(shu)是肝(gan)损伤(shang)(shang)机理研(yan)(yan)究(jiu)、保肝(gan)药(yao)物和NASH药(yao)物药(yao)效评价的(de)(de)(de)理想模(mo)(mo)型。
目前业(ye)界认为最好NASH和肝癌小(xiao)(xiao)鼠模型(xing)是DIAMOND模型(xing)和MUP-uPA模型(xing)，而Tet-uPA比MUP-uPA小(xiao)(xiao)鼠更具优势，因(yin)为MUP-uPA小(xiao)(xiao)鼠是在接近成体时（5、6周(zhou)龄）表(biao)达uPA，窗(chuang)口期有一定限制，而Tet-uPA小(xiao)(xiao)鼠可以在任意时期诱导uPA的表(biao)达。
B6.Tet-uPA小鼠注(zhu)射Dox（100mg/kg）后血清ALT/AST
B6.Tet-uPA诱导(dao)(dao)肝损伤并HDF饲喂3个月，可以诱导(dao)(dao)类似于(yu)人的NASH模型
天狼(lang)猩红染色 HE染色
应用领域
1.急慢性肝(gan)损(sun)伤(shang)模型等相关研究。
2.NASH模(mo)型、肝癌模(mo)型、以及药(yao)物安全性评估等相关研究。
参考文献
1.A Mouse Model of Inducible Liver Injury Caused by Tet-On Regulated Urokinase for Studies of Hepatocyte Transplantation.The American Journal of Pathology.Volume 175, Issue 5, November 2009, Pages 1975-1983.
2.Preclinical Models for Studying NASH-Driven HCC: How Useful Are They?Cell Metabolism 29, January 8, 2019
