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多种(zhong)原(yuan)因可以造成大小(xiao)鼠繁(fan)育(yu)出现障(zhang)碍，如(ru)由于老龄化(hua)造成精子活(huo)力的(de)降低，或(huo)由于疾病或(huo)意外(wai)造成繁(fan)育(yu)期动物(wu)(wu)生(sheng)命垂危，这时可以通过维通达提供的(de)辅助生(sheng)殖技术进(jin)行(xing)动物(wu)(wu)品系(xi)的(de)恢复。
可以将冻精(jing)(jing)复(fu)苏后(hou)，或者新鲜精(jing)(jing)液输(shu)送到(dao)发(fa)情期大小(xiao)鼠子(zi)(zi)宫的技术。操作比较(jiao)简单(dan)，缺点是(shi)需要精(jing)(jing)子(zi)(zi)的量比较(jiao)大。
体(ti)外(wai)(wai)受(shou)(shou)(shou)精(jing)(jing)（In Vitro Fertilization，IVF）是指(zhi)哺乳动物的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)和卵子(zi)(zi)(zi)在体(ti)外(wai)(wai)完成受(shou)(shou)(shou)精(jing)(jing)过(guo)程的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)技(ji)术(shu)。小鼠(shu)(shu)体(ti)外(wai)(wai)受(shou)(shou)(shou)精(jing)(jing)技(ji)术(shu)可以(yi)分(fen)为冷(leng)冻(dong)精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)体(ti)外(wai)(wai)受(shou)(shou)(shou)精(jing)(jing)和新鲜分(fen)离精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)体(ti)外(wai)(wai)受(shou)(shou)(shou)精(jing)(jing)。在小鼠(shu)(shu)体(ti)外(wai)(wai)受(shou)(shou)(shou)精(jing)(jing)技(ji)术(shu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)发展中，有(you)3个技(ji)术(shu)优化(hua)(hua)特别重要，显著(zhu)提高了小鼠(shu)(shu)体(ti)外(wai)(wai)受(shou)(shou)(shou)精(jing)(jing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)成功率(lv)。（1）添(tian)加(jia)环(huan)状(zhuang)糊精(jing)(jing)（MBCD）提高了精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)获(huo)能的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)效率(lv)，超(chao)活化(hua)(hua)（鞭(bian)打运动）精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)比例(li)(li)增加(jia)，从而提高IVF的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)效率(lv)。获(huo)能后的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)才具有(you)受(shou)(shou)(shou)精(jing)(jing)能力，研究表明(ming)牛血清蛋白(bai)（BSA）、牛精(jing)(jing)浆蛋白(bai)（BSP）、高密度脂蛋白(bai)（HDL）和MBCD等会促使精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)膜上胆固醇流失，诱导精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)获(huo)能。MBCD增加(jia)蛋白(bai)质酪(lao)氨酸磷酸化(hua)(hua)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)能力，与胆固醇强(qiang)烈结(jie)合，破坏脂筏（lipid rafts），从而实现(xian)高比例(li)(li)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)获(huo)能。（2）精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)和卵子(zi)(zi)(zi)IVF过(guo)程的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)优化(hua)(hua)，①高钙(2.04mM提高到(dao)5.09mM)、添(tian)加(jia)Reduced glutathione (GSH)和不含脂肪酸的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)BSA-HTF受(shou)(shou)(shou)精(jing)(jing)液；②合适的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)卵母细胞(bao)采(cai)集时间，包括超(chao)数排卵和体(ti)外(wai)(wai)采(cai)集卵母细胞(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)时间。（3）精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)冻(dong)存(cun)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)优化(hua)(hua)，经典(dian)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法是1990年(nian)报道的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)R18S3的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)法（18%的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)棉(mian)子(zi)(zi)(zi)糖(tang)+3%脱(tuo)脂乳）。在2010年(nian)Takeo和Nakagata教(jiao)授(shou)报道添(tian)加(jia)l-glutamine可以(yi)精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)冷(leng)冻(dong)复(fu)苏效率(lv)（小鼠(shu)(shu)精(jing)(jing)子(zi)(zi)(zi)冻(dong)存(cun)复(fu)苏和IVF的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)发展历(li)史，见下图(tu)。摘至(zhi)Cryobiology, 2018, doi: 10.1016/j.cryobiol.2018.04.008.）。
目前小鼠体外受(shou)精(jing)技术(shu)基(ji)本是(shi)从上(shang)面三(san)个(ge)方面进行优(you)化，维通达公司在以上(shang)技术(shu)的基(ji)础上(shang)，优(you)化了成(cheng)功率(lv)。
当精(jing)(jing)(jing)子失去运动(dong)能力(li)时，维(wei)通达(da)采(cai)用(yong)单精(jing)(jing)(jing)胞(bao)质内(nei)注(zhu)(zhu)射进行品(pin)系的(de)(de)(de)恢复。单精(jing)(jing)(jing)子卵(luan)胞(bao)浆显(xian)微(wei)注(zhu)(zhu)射（ICSI）是使用(yong)显(xian)微(wei)操作技(ji)术(shu)将(jiang)精(jing)(jing)(jing)子注(zhu)(zhu)射到卵(luan)细(xi)胞(bao)胞(bao)浆内(nei)，使卵(luan)子受精(jing)(jing)(jing)，体(ti)外(wai)培养到早期(qi)胚(pei)胎，再(zai)放(fang)回母体(ti)子宫内(nei)发育着(zhe)床。小鼠的(de)(de)(de)单精(jing)(jing)(jing)子注(zhu)(zhu)射技(ji)术(shu)比较(jiao)成熟，基本(ben)采(cai)用(yong)piezo辅(fu)助的(de)(de)(de)技(ji)术(shu)，将(jiang)部分断尾(wei)的(de)(de)(de)精(jing)(jing)(jing)子头注(zhu)(zhu)射到MII期(qi)的(de)(de)(de)卵(luan)细(xi)胞(bao)胞(bao)浆内(nei)。
尽(jin)管ICSI技术需要的精(jing)子(zi)数(shu)量少，对精(jing)子(zi)活力没有要求(qiu)，但(dan)尽(jin)量还是要选择来源和保存方(fang)法明确(que)的精(jing)子(zi)，至少确(que)保精(jing)子(zi)DNA的完(wan)整性，这样(yang)ICSI获得(de)的小(xiao)鼠(shu)胚(pei)胎(tai)才可(ke)能(neng)发育成(cheng)存活的小(xiao)鼠(shu)。
若雌(ci)性动物意外死亡，或者(zhe)客(ke)户有按照(zhao)标准程序冻存的卵巢小组(zu)织块时(shi)，维(wei)通达提供(gong)卵巢移植的方法恢(hui)复(fu)小鼠(shu)或大鼠(shu)品(pin)系。
辅(fu)助生殖技术(shu)是确(que)保模(mo)型小(xiao)(xiao)鼠满足CRO、科研和生产需要的(de)(de)(de)基本技术(shu)，可(ke)以(yi)解(jie)决小(xiao)(xiao)鼠准备和扩繁过程中(zhong)遇到的(de)(de)(de)各(ge)种(zhong)问题(ti)。辅(fu)助生殖技术(shu)在(zai)大(da)小(xiao)(xiao)鼠模(mo)型领域的(de)(de)(de)应(ying)用主要包括：
快速扩繁，一代可以获(huo)得大量小鼠；
可以(yi)同(tong)一天移(yi)植(zhi)大量胚胎，得到(dao)大批(pi)量同(tong)日龄(ling)小(xiao)鼠；
小(xiao)鼠丧(sang)失交配能力，或者不育；
雄鼠数量少，需要(yao)快速(su)扩群(qun)；
出(chu)现微生物污染，需要净化；
冷冻精(jing)子，需要恢复成(cheng)小鼠；
获得大量胚胎，用于冻存、显微注射或者其他试(shi)验研究(jiu)；
受精机理的研究(jiu)
另外，维通达可以(yi)协(xie)助客户(hu)进行辅助生(sheng)(sheng)殖技术的(de)(de)(de)研发。通过模(mo)拟体内受(shou)(shou)精(jing)和(he)发育环境，提高受(shou)(shou)精(jing)和(he)发育的(de)(de)(de)效率；在培养体系中添加(jia)蛋白质、生(sheng)(sheng)长因子和(he)化(hua)学小分(fen)子，以(yi)期(qi)阐明受(shou)(shou)精(jing)和(he)胚胎(tai)(tai)发育的(de)(de)(de)机制，提供更(geng)加(jia)适合(he)受(shou)(shou)精(jing)和(he)发育的(de)(de)(de)体外条件。这(zhei)(zhei)些(xie)技术可以(yi)简单(dan)的(de)(de)(de)归为三类：（1）胚胎(tai)(tai)或配(pei)子移(yi)植(zhi)(zhi)；（2）亚(ya)细胞(bao)水平(ping)的(de)(de)(de)移(yi)植(zhi)(zhi)，如细胞(bao)核移(yi)植(zhi)(zhi)；（3）多(duo)能性细胞(bao)分(fen)化(hua)或转(zhuan)分(fen)化(hua)，如ES或者(zhe)皮肤细胞(bao)分(fen)化(hua)成胚胎(tai)(tai)，即(ji)不依赖生(sheng)(sheng)殖细胞(bao)直接(jie)在体外人(ren)造(zao)胚胎(tai)(tai)。在这(zhei)(zhei)些(xie)技术中，胚胎(tai)(tai)移(yi)植(zhi)(zhi)，体外受(shou)(shou)精(jing)和(he)单(dan)精(jing)注射相(xiang)对成熟(shu)，已经商业化(hua)应用。
年代 | 方法 | 简介(jie) | 应用 |
1890~ | 胚胎移植（ET） | 同步化代孕(yun)受体的输(shu)卵管或者子(zi)宫移植 | 技术成熟，商业化普及 |
1952~ | 细胞核移植（CNT） | 将(jiang)胚胎细(xi)胞、ES细(xi)胞或体细(xi)胞的核显微注射到去核的卵母细(xi)胞中(zhong) | 研发优化中(zhong)， 商业化公司(si)少 |
1959~ | 体(ti)外受(shou)精（IVF） | 获能(neng)的(de)精子与成熟的(de)卵体外受精 | 技术成熟，商业化普及 |
1976~ | 单精(jing)注射（ICSI） | 直接将(jiang)精子或去尾的精子注射到卵母细胞中(zhong) | 技术成(cheng)熟(shu)，难度较大，商业化推广中(zhong) |
1992~ | 重组卵巢移(yi)植（ROT） | 卵(luan)巢(chao)组织(zhi)移植；或者原始生殖细(xi)胞（PGCs）与(yu)胚胎(tai)期卵(luan)巢(chao)体细(xi)胞重(zhong)新聚合在(zai)一(yi)起(qi)；移植到(dao)受体鼠的卵(luan)巢(chao)囊(nang)(nang)或者肾(shen)囊(nang)(nang)下，重(zhong)组的卵(luan)巢(chao)中卵(luan)子形成后，可以自然交配(pei)或者ICSI获(huo)得后代小鼠 | 研发优化(hua)中(zhong)， 商业(ye)化公司少 |
2009~ | 重组睾丸(wan)移(yi)植（RTT） | 原始(shi)生殖细(xi)胞（PGCs）与胚胎期睾(gao)丸(wan)体(ti)(ti)细(xi)胞重新聚合在一起；移植到受体(ti)(ti)鼠(shu)的(de)睾(gao)丸(wan)囊(nang)，这些重组(zu)的(de)睾(gao)丸(wan)中精子(zi)形成后(hou)，可以自然(ran)交配或者ICSI获(huo)得(de)后(hou)代小(xiao)鼠(shu) | 研发中 |
2018 | 人造胚胎(tai) | 3D基质(zhi)培养，获(huo)得3胚层特征的胚胎样结构，符合胚胎的特征 | 研发中 |
