联系我们Contact us
SARS-CoV-2 假(jia)病
假(jia)病毒描述：
SARS-CoV-2假病毒以HIV病毒为骨架，外面包(bao)被SARS-Cov-2的 Spike 蛋(dan)白，能够感染过表达人ACE2的(de)细胞。可(ke)(ke)用于(yu)测试(shi)研究阻断病毒侵入(ru)的(de)中和抗体(ti)或其它(ta)药物。假病毒只能单(dan)次感染，不能复制，安全性高，可(ke)(ke)在(zai)P2级实(shi)验(yan)室(shi)使用。
假病(bing)毒参数：
产品名称 | SARS-CoV-2 假病毒(du) |
货号 | VS-SC-0001 |
荧光基(ji)团 | eGFP和(he)Luciferase |
生物安全防护(hu)措施 | P2级(ji)实验(yan)室 |
包装 | 100~200ul |
感染滴度 | 2×105 TU*（基(ji)于hACE2-COS7细胞） |
拷(kao)贝数(shu) | ＞108 |
保存(cun) | -80℃ |
* TU（transfection unit），1TU=使1个细胞发出绿色(se)荧光。
假病毒制备：
维通达将Spike蛋白表达质(zhi)(zhi)粒、包装质(zhi)(zhi)粒、转(zhuan)移质(zhi)(zhi)粒共(gong)转(zhuan)染到293T细胞内(nei)，包(bao)装出以SARS-CoV-2-Spike为表面衣(yi)壳(qiao)蛋白的假病毒。假病毒同时带有Firefly Luc和eGFP标记(ji)，可以通(tong)过有(you)Firefly Luc和eGFP检(jian)测感(gan)染。示(shi)意图(tu)如(ru)下：
注意事项：
1) 病毒使用PEG8000浓(nong)缩(suo)，会(hui)有血清蛋白沉(chen)淀，外观浑浊，但不影(ying)响使用。
2) 病(bing)毒干冰运输(shu)，-80℃保(bao)存(cun)，使用(yong)前室温(wen)融化。
使用方(fang)法：
1. 第一天，96孔板(ban)每孔接(jie)种(zhong)5×103个hACE2-COS7细胞。
2. 第二天，除去培(pei)(pei)养板里(li)的培(pei)(pei)养基，新鲜培(pei)(pei)养基（100ul/孔）与假(jia)病(bing)毒(du)2×103 TU和Polybrene混(hun)合（5ug/ml终(zhong)浓度(du)），加(jia)入培养孔(kong)，培养板离心（1200g x 2 Hour，4℃）。
（2×103 TU时，luciferase的(de)亮度约(yue)为1×106）。
3. 离(li)心(xin)感(gan)染的细胞，吸(xi)干(gan)净培养基，再用PBS洗一次；每孔(kong)加入30ul 0.25%的胰(yi)酶(mei)，37℃孵育5min，加入(ru)100ul完全培养基，继(ji)续培养。
4. 感染后(hou)继续培养3天（每天换液(ye)），进行(xing)luc检测(ce)，也可(ke)以观察eGFP荧(ying)光（根(gen)据(ju)情况更(geng)换培养基）。
