联系我们Contact us
1.基本(ben)信(xin)息
品系名称(cheng) | NOD-(H2D H2K)em1 Prkdcscid Il2rgtm1 /Vst |
常用名(ming) | NPG-H2D*H2K KO；NPG.H2D-H2K-；NPG-(KD)null |
来源 | 北(bei)京(jing)维通达生物技术有限公司 |
背景(jing) | NOD SCID/NcrCrl |
毛色 | 白色 |
鉴定方(fang)法 | Standard PCR |
品系建立：采(cai)用CRISPR-CAS9技术(shu)将NPG小鼠17号染色体的H2D和(he)H2K基因全部删(shan)除(chu)，获得KD双基因敲(qiao)除(chu)的首建鼠。 NPG-(KD)null纯合(he)敲(qiao)除(chu)小鼠缺失小鼠缺乏小鼠主要组织相容性复(fu)合(he)体(MHC) I类分子，并在(zai)人外周血单个(ge)核(he)细(xi)胞(PBMC)移植后表现(xian)出减少(shao)异种移植物抗宿主病反(fan)应(xeno-GVHD)。经过(guo)PBMC移植实(shi)(shi)验，证明该小鼠比(bi)NPG小鼠晚(wan)发生GVHD（体重、活动能力、姿势、毛发和(he)皮肤(fu)完整性等），可以用于(yu)外周血人源化和(he)Hu-NPG (KD)null-CDX/PDX小鼠药效学实(shi)(shi)验。
2.繁(fan)育信息(xi)
交配方式(shi)：纯合*纯合；隔离器(qi)生(sheng)产
日粮(liang)信息(xi)：SPF 繁殖鼠粮(liang)
3.表(biao)型(xing)与应(ying)用(yong)
H2D和H2K基(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)都位于小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)的(de)(de)(de)17号染色体(ti)(ti)，是(shi)MHC I类(lei)(lei)分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)。NPG小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)移(yi)(yi)植(zhi)(zhi)人PBMC或(huo)分(fen)(fen)(fen)(fen)离的(de)(de)(de)T细胞(bao)等免疫(yi)细胞(bao)后(hou)会发生移(yi)(yi)植(zhi)(zhi)物(wu)抗宿主病（GvHD），严重(zhong)的(de)(de)(de)情况(kuang)下造成(cheng)小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)在(zai)(zai)数周内(nei)死(si)亡。考虑(lv)到GvHD主要(yao)由MHC I类(lei)(lei)、II类(lei)(lei)分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)介导，而且I类(lei)(lei)分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)表(biao)(biao)达(da)更(geng)广(guang)泛，起主要(yao)介导作用(yong)，因(yin)此(ci)(ci)敲(qiao)(qiao)(qiao)除(chu)I类(lei)(lei)分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)可(ke)以减缓GvHD的(de)(de)(de)发生。MHC I类(lei)(lei)分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)由α、β两个(ge)(ge)亚(ya)基(ji)(ji)(ji)(ji)组成(cheng)，敲(qiao)(qiao)(qiao)除(chu)任一(yi)个(ge)(ge)亚(ya)基(ji)(ji)(ji)(ji)都使I类(lei)(lei)分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)不(bu)(bu)再表(biao)(biao)达(da)。小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)的(de)(de)(de)β2-微(wei)球蛋(dan)白（由B2M基(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)编码）是(shi)MHC I类(lei)(lei)分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)的(de)(de)(de)β亚(ya)基(ji)(ji)(ji)(ji)，敲(qiao)(qiao)(qiao)除(chu)之后(hou)I类(lei)(lei)分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)不(bu)(bu)再表(biao)(biao)达(da)，小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)移(yi)(yi)植(zhi)(zhi)PBMC之后(hou)GvHD的(de)(de)(de)发生明显减缓。但(dan)是(shi)β2-微(wei)球蛋(dan)白同时还是(shi)抗体(ti)(ti)IgG的(de)(de)(de)受体(ti)(ti)FcRn的(de)(de)(de)亚(ya)基(ji)(ji)(ji)(ji)，FcRn负责抗体(ti)(ti)的(de)(de)(de)内(nei)吞-再循环，与抗体(ti)(ti)在(zai)(zai)血液中的(de)(de)(de)半衰期(qi)有关，B2M敲(qiao)(qiao)(qiao)除(chu)之后(hou)抗体(ti)(ti)的(de)(de)(de)半衰期(qi)变短，因(yin)此(ci)(ci)B2M敲(qiao)(qiao)(qiao)除(chu)鼠(shu)(shu)不(bu)(bu)适合作为评(ping)价抗体(ti)(ti)药的(de)(de)(de)模(mo)型。NPG小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)MHC I类(lei)(lei)分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)的(de)(de)(de)α亚(ya)基(ji)(ji)(ji)(ji)有两种：H2K和H2D。这(zhei)两个(ge)(ge)基(ji)(ji)(ji)(ji)因(yin)敲(qiao)(qiao)(qiao)除(chu)之后(hou)MHC I类(lei)(lei)分(fen)(fen)(fen)(fen)子(zi)(zi)就不(bu)(bu)在(zai)(zai)表(biao)(biao)达(da)。使用(yong)NPG-(KD)null小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)建立PBMC人源化小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)模(mo)型可(ke)以比NPG小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)的(de)(de)(de)PBMC模(mo)型获得更(geng)长的(de)(de)(de)实验(yan)窗口期(qi)，因(yin)而是(shi)一(yi)种更(geng)理(li)想的(de)(de)(de)人源化小(xiao)(xiao)(xiao)鼠(shu)(shu)模(mo)型，在(zai)(zai)肿(zhong)瘤免疫(yi)研(yan)究中具有重(zhong)要(yao)应用(yong)价值。
3.1.流(liu)式细胞(bao)分析小鼠MHC I类分子(zi)（H2KD）的表达
3.2.人(ren)PBMC（5*106 cells/mouse）移(yi)植后，两种小鼠外(wai)周血中hCD45+细(xi)胞的比例流式(shi)细(xi)胞分析(xi)结(jie)果
3.3人PBMC（5*106 cells/mouse）移植(zhi)后，两种小鼠(shu)体重变化
3.4.人(ren)PBMC（5*106 cells/mouse）移植后，两种小鼠(shu)的(de)GvHD临床评分(fen)
4.应用领域(yu)
异源(yuan)移植GVHD体内机理研究
Hu-NPG-(KD)null-PDX小(xiao)鼠(shu)药(yao)效学(xue)实验，如肿瘤免疫(yi)抗(kang)体(ti)药(yao)物、Car-T的(de)药(yao)效研究(jiu)等(deng)。
新的人源化动物模型研发
参考文(wen)献
Covassin L, Jangalwe S, Jouvet N, Laning J, Burzenski L, Shultz LD, Brehm MA. Human immune system development and survival of non-obese diabetic (NOD)-scid IL2rγ(null) (NSG) mice engrafted with human thymus and autologous haematopoietic stem cells. Clin Exp Immunol. 2013 Dec;174(3):372-88.
