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1. 基(ji)本信息
品系名称：NOD. Prkdcscid Il2rgtm1 VstTg(Csf1p –IL2)Vst/Vst
常用名：hIL2-NPG /Vst; NPG.hIL-2
背景 ：NOD-scid/NcrCrl
毛色：白色
品系(xi)建(jian)立：将mouse CSF1-promoter与人(ren)Interleukn-2（IL-2）基(ji)因(yin)(yin)(yin)的CDS序列相连接(jie)，构建(jian)pcDNA3.1-CSF1P-IL2转基(ji)因(yin)(yin)(yin)载(zai)体质粒，扩增、抽提、去内毒素后，使用Hind3+Stu1双酶切线性化，回(hui)收(shou)3.1Kb目的片(pian)段进行胚胎显微(wei)注射，注射到NPG小(xiao)鼠受精卵的原(yuan)核(he)中。在获得的子代中筛(shai)选合适表达量(liang)的阳性小(xiao)鼠。在隔离(li)器中，按照转基(ji)因(yin)(yin)(yin)阳性鼠配NPG小(xiao)鼠的方式扩繁，建(jian)立商(shang)品化hIL2-NPG小(xiao)鼠品系(xi)。
2.hIL-2 NPG表型特征
在NPG小鼠(shu)中(zhong)表(biao)达人(ren)(ren)的(de)(de)IL-2细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)因(yin)子。IL-2 是(shi)一种介(jie)导白细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)之间相互作用的(de)(de)细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)因(yin)子，起(qi)先被称为T细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)生长(zhang)因(yin)子，可刺激(ji)(ji)T细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)、NK细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)、B细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)增殖(zhi)并加强(qiang)它(ta)们的(de)(de)功(gong)能(neng)。由于小鼠(shu)的(de)(de)IL-2与人(ren)(ren)的(de)(de)IL-2存在种属(shu)差(cha)异，而且在NPG这(zhei)样的(de)(de)免(mian)(mian)疫缺陷(xian)小鼠(shu)中(zhong)IL-2的(de)(de)分(fen)泌本来就(jiu)减(jian)弱，所以在造(zao)血干细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)移(yi)(yi)植或免(mian)(mian)疫细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)移(yi)(yi)植建立的(de)(de)人(ren)(ren)源(yuan)化(hua)(hua)(hua)免(mian)(mian)疫系统小鼠(shu)中(zhong)缺乏IL-2刺激(ji)(ji)信(xin)号(hao)，致使依赖IL-2因(yin)子的(de)(de)细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，尤(you)其是(shi)NK细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)分(fen)化(hua)(hua)(hua)发育和功(gong)能(neng)发挥(hui)受(shou)到影响(xiang)。表(biao)达人(ren)(ren)IL-2的(de)(de)NPG小鼠(shu)可以促进人(ren)(ren)源(yuan)化(hua)(hua)(hua)免(mian)(mian)疫系统小鼠(shu)T细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)、NK细(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)分(fen)化(hua)(hua)(hua)发育，增强(qiang)其功(gong)能(neng)。
hIL2-NPG小鼠的(de)外周血(xue)中，ELISA检测人(ren)IL-2在(zai)血(xue)清里的(de)含量为40~70pg/ml。
以(yi)下是hIL2-NPG小鼠移植脐带(dai)血(xue)分离的CD34阳性造(zao)血(xue)干细胞(bao)之(zhi)后主要人源免疫细胞(bao)的重建的一个实例。
▲在hIL2-NPG小鼠上移植CD34+造血干细(xi)胞(bao)4周(zhou)后，小鼠外周(zhou)血中人源(yuan)CD45阳性细(xi)胞(bao)的(de)比(bi)例(li)可以达(da)到较高水平(ping)（均值达(da)40%以上）。在人源(yuan)CD45阳性细(xi)胞(bao)中，CD56阳性的(de)NK细(xi)胞(bao)所占比(bi)例(li)较高，并在移植8周(zhou)之后稳定(ding)维持高水平(ping)重建。
IL-2除了(le)促进NK细(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)分化发育(yu)，对T细(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)发育(yu)也(ye)有较(jiao)强的(de)(de)(de)促进作(zuo)用(yong)。但是(shi)由于(yu)T细(xi)(xi)胞(bao)(bao)分化发育(yu)较(jiao)晚(wan)，在HSC移植(zhi)12周(zhou)时CD3阳性T细(xi)(xi)胞(bao)(bao)仍处在较(jiao)低水平。因(yin)此，HSC移植(zhi)的(de)(de)(de)hIL2-NPG小鼠模(mo)型(xing)有约两个月的(de)(de)(de)以人源NK细(xi)(xi)胞(bao)(bao)为主的(de)(de)(de)窗(chuang)口(kou)期（移植(zhi)后4-12周(zhou)）。此模(mo)型(xing)可以作(zuo)为体(ti)内研(yan)究NK功(gong)能以及(ji)通过NK细(xi)(xi)胞(bao)(bao)功(gong)能发挥(hui)抗肿瘤、抗病毒作(zuo)用(yong)（如ADCC作(zuo)用(yong)）药效评(ping)价的(de)(de)(de)理(li)想模(mo)型(xing)。
除应用于(yu)CD34+造(zao)血干细(xi)胞移植(zhi)外，hIL2-NPG小(xiao)鼠也支(zhi)持从成体PBMC分离的(de)(de)NK细(xi)胞的(de)(de)移植(zhi)。经数据验(yan)证，纯化(hua)的(de)(de)NK细(xi)胞可(ke)在此小(xiao)鼠上(shang)稳(wen)定维持及增殖。
