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1.基本信息
品系名称：CB6F1-Tg (HRAS)9/Vst
常用名：rasH小鼠(shu)
背景：BALB/cAnNCrl*C57BL/6NCrl
毛(mao)色：黑色
鉴(jian)定方(fang)法：Standard PCR
2.品系建(jian)立
维通达rasH小(xiao)鼠是rasH2转基因小(xiao)鼠的(de)替代模型(xing)之一。rasH2转基因鼠是由日本(ben)CIEA研制，通过原核注(zhu)射(she)使小鼠全(quan)身过表达(da)人HRAS基因获得，该(gai)小鼠模型(xing)广泛用于(yu)药物安评中的致瘤性评价试验(yan)。其自发(fa)肿瘤(liu)率并不高，在(zai)出生的6个月内很少出现肿瘤或癌前细胞增生，但表(biao)现出对(dui)基因毒(du)性化(hua)(hua)合物及非基因毒(du)性化(hua)(hua)合物的致瘤敏感性增强，在(zai)受到致癌物诱导(dao)时可在较(jiao)短时间内高(gao)发肿瘤。1990年代，被美国(guo)FDA批准用于(yu)药物(wu)(wu)安(an)全(quan)性(xing)评价(jia)中的(de)致瘤性(xing)试验(yan)，用为期半年(nian)的(de)实验(yan)代替原规定的(de)为期两年(nian)的(de)普通啮齿(chi)类动(dong)物(wu)(wu)致瘤性(xing)试验(yan)。
维通达构(gou)建(jian)了(le)包含人(ren)HRAS基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)的编码序(xu)(xu)列、内含子(zi)以及上下游非(fei)编码区的染色(se)体DNA片段的转(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)载体，获得(de)目的片段DNA全长约为7.6 Kb，并在其(qi)最末一(yi)个(ge)内含子(zi)的序(xu)(xu)列中引(yin)入一(yi)个(ge)点突(tu)变(bian)（据报道(dao)该(gai)突(tu)变(bian)可增强HRAS基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)表(biao)(biao)达），使其(qi)可以在HRAS基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)自身调(diao)控序(xu)(xu)列的驱动下表(biao)(biao)达）。将转(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)片段注射(she)到C57BL/6N小鼠(shu)(shu)(shu)受精卵原核(he)内，获得(de)转(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)阳性首建(jian)鼠(shu)(shu)(shu)，分(fen)(fen)别扩繁(fan)建(jian)系，进行表(biao)(biao)型分(fen)(fen)析(xi)，从中筛选符合(he)致瘤性试(shi)验的第9个(ge)系予以保留。用数字定(ding)(ding)量(liang)PCR法确(que)定(ding)(ding)，该(gai)系单位点串联(lian)转(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)拷贝数4个(ge)，用染色(se)体步(bu)移法确(que)定(ding)(ding)转(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)串联(lian)片段，整合(he)于小鼠(shu)(shu)(shu)第6号(hao)染色(se)体上。利用Western blot检测(ce)小鼠(shu)(shu)(shu)各器官组织转(zhuan)基(ji)(ji)因(yin)(yin)(yin)表(biao)(biao)达情况，结果表(biao)(biao)明(ming)HRAS在小鼠(shu)(shu)(shu)前胃(wei)和肺脏中具有较高的表(biao)(biao)达量(liang)。
3.繁(fan)育信息
交配(pei)方式：阳性（杂(za)合(he)）配(pei)野(ye)生
日粮信息：SPF 繁殖(zhi)鼠(shu)粮
平均产子(zi)数（只）：6
繁育周期(周)：36
4.rasH小鼠(shu)的致瘤(liu)敏(min)感性
1.rasH小鼠(shu)在(zai)6月龄前极少自(zi)发(fa)肿瘤。在(zai)12月龄时约(yue)有(you)10%~20%死于自(zi)发(fa)肿瘤。
2.当用Urethane 50mg/kg ip.tiw诱导时，在6个月内70%以(yi)上小鼠发现肺部肿(zhong)瘤，也(ye)有(you)部分(fen)有(you)肝脏肿(zhong)瘤、肉瘤等(deng)。
肉瘤(liu)及(ji)其病理(li)切片，40X倍
3.rasH小鼠(shu)应用于污水的致瘤(liu)性(xing)实验。使用甲基亚硝基脲作为阳性(xing)对照，在三个月时观(guan)察到小鼠(shu)胃(wei)部有实体瘤(liu)产生。污水灌胃(wei)使rasH小鼠(shu)在胃(wei)部能(neng)够形成明显的肿瘤(liu)，也(ye)在乳腺(xian)观(guan)察到肿瘤(liu)。
