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品系(xi)净化是指，通过特定处理，消除病毒(du)、细(xi)菌(jun)和寄生虫(chong)，得到SPF级别动(dong)物的(de)服务。维(wei)通达通过胚(pei)胎清洗(xi)和胚(pei)胎移植(zhi)的(de)方式(shi)，获得SPF级别的(de)动(dong)物；同时(shi)委托第(di)三(san)方提(ti)供相(xiang)关微(wei)生物检(jian)测(ce)(ce)服务，出具相(xiang)关检(jian)测(ce)(ce)合格(ge)报告。
1.服务类别
净(jing)化服务(wu)，根(gen)据饲(si)养(yang)环境(jing)不同分为两类：IVC净(jing)化和(he)隔离(li)器(qi)净(jing)化。根(gen)据净(jing)化级别，使(shi)用(yong)的代(dai)孕鼠和(he)净(jing)化方(fang)案、设施均不同。常用(yong)的净(jing)化标准包括：（1）VAF/PLUS®；（2）GB-SPF；（3）VAF/ELITE®；（4）定制标准。
根(gen)据基因型不同，可以分为(wei)纯合净化或者杂合净化。纯合净化需要(yao)(yao)准备一定数量(liang)，基因型均为(wei)纯合的雌鼠和雄(xiong)(xiong)鼠；杂合净化只需要(yao)(yao)提供基因型符合需要(yao)(yao)的2~3只可育雄(xiong)(xiong)鼠即可。
2.服务(wu)简介
胚胎净(jing)化(hua)的(de)(de)目(mu)(mu)的(de)(de)是获得(de)无特(te)定(ding)病(bing)(bing)原体（Specific pathogen Free, SPF）动物，即体内无特(te)定(ding)的(de)(de)微生物和(he)(he)寄生虫(chong)存在的(de)(de)动物。常用的(de)(de)方法(fa)包括剖腹(fu)产和(he)(he)胚胎移(yi)植(zhi)，但由(you)于剖腹(fu)产不能消除垂直传(chuan)播的(de)(de)病(bing)(bing)毒（如鼠巨细(xi)胞病(bing)(bing)毒MCMV；淋巴细(xi)胞性脑膜炎病(bing)(bing)毒LCMV和(he)(he)脑胞内原虫(chong)ECUN），且对于手术设施(shi)依赖程度较大，目(mu)(mu)前通(tong)过(guo)胚胎移(yi)植(zhi)的(de)(de)方法(fa)，消除病(bing)(bing)毒、细(xi)菌和(he)(he)寄生虫(chong)，是易行(xing)的(de)(de)品(pin)系净(jing)化(hua)方法(fa)。
胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)净(jing)(jing)(jing)化的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)原(yuan)理，是(shi)(shi)发育(yu)早期游离状态的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)有(you)(you)透(tou)明(ming)带(dai)(dai)，可以防止(zhi)细(xi)菌、寄生(sheng)(sheng)(sheng)虫(chong)和大部(bu)分(fen)病毒的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)侵袭；通(tong)(tong)过(guo)无(wu)限稀释(shi)(shi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)将(jiang)透(tou)明(ming)带(dai)(dai)外面的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)微(wei)生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)含量(liang)降至极低的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)水平，移(yi)植到(dao)代(dai)孕的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)健康小鼠(shu)体内后，小鼠(shu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)免疫系(xi)统(tong)会(hui)(hui)清除掉这(zhei)些(xie)微(wei)生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)，而达到(dao)净(jing)(jing)(jing)化的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)目的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)。国际胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)移(yi)植协会(hui)(hui)推荐的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)标(biao)准，是(shi)(shi)在特定的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)培(pei)(pei)养(yang)(yang)液(ye)微(wei)滴中(zhong)进(jin)行(xing)(xing)10次(ci)清洗(xi)，每(mei)次(ci)大约100倍(bei)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)稀释(shi)(shi)。即便如(ru)此，仍(reng)有(you)(you)净(jing)(jing)(jing)化失败的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)风险(xian)，例如(ru)，鼠(shu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)细(xi)小病毒（MMV），有(you)(you)研究发现(xian)其可以通(tong)(tong)过(guo)透(tou)明(ming)带(dai)(dai)进(jin)入(ru)胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)内部(bu)；有(you)(you)时采用的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)是(shi)(shi)通(tong)(tong)过(guo)体外受精（IVF），或(huo)透(tou)明(ming)带(dai)(dai)受到(dao)破坏(huai)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)（如(ru)冷冻、解(jie)冻），这(zhei)些(xie)情(qing)况需(xu)(xu)要(yao)(yao)采用不同(tong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)策略。研究发现(xian)，通(tong)(tong)过(guo)胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)移(yi)植进(jin)行(xing)(xing)净(jing)(jing)(jing)化，胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)获取(qu)(qu)方(fang)(fang)法(fa)（雌(ci)鼠(shu)和雄鼠(shu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)准备）和胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)处理（洗(xi)涤(di)和培(pei)(pei)养(yang)(yang)）策略，会(hui)(hui)影响胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)净(jing)(jing)(jing)化的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)结果[1~4]。胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)获取(qu)(qu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)中(zhong)，采用雄鼠(shu)（携带(dai)(dai)病原(yuan)体）与同(tong)品系(xi)雌(ci)鼠(shu)（SPF）交配(pei)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)获得胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)，后代(dai)净(jing)(jing)(jing)化污染病原(yuan)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)风险(xian)很低；可以不需(xu)(xu)要(yao)(yao)对胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)进(jin)行(xing)(xing)微(wei)生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)分(fen)析，即杂合净(jing)(jing)(jing)化[2]。胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)处理常(chang)用的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)方(fang)(fang)法(fa)是(shi)(shi)多次(ci)洗(xi)涤(di)和一(yi)定时间的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)培(pei)(pei)养(yang)(yang)[1,3]。若胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)是(shi)(shi)通(tong)(tong)过(guo)IVF，或(huo)透(tou)明(ming)带(dai)(dai)受到(dao)破坏(huai)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)（如(ru)冷冻、解(jie)冻），需(xu)(xu)要(yao)(yao)对胚(pei)胎(tai)(tai)(tai)(tai)(tai)培(pei)(pei)养(yang)(yang)液(ye)进(jin)行(xing)(xing)分(fen)析，以确认(ren)是(shi)(shi)否有(you)(you)病原(yuan)微(wei)生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)污染，这(zhei)些(xie)净(jing)(jing)(jing)化后代(dai)需(xu)(xu)要(yao)(yao)每(mei)窝分(fen)别检(jian)测[4]。
为了确(que)保净(jing)(jing)化(hua)(hua)成功(gong)，需要对(dui)净(jing)(jing)化(hua)(hua)的流程进行(xing)(xing)标准(zhun)化(hua)(hua)控制（见图示）。①净(jing)(jing)化(hua)(hua)前(qian)，对(dui)净(jing)(jing)化(hua)(hua)品(pin)系(xi)的病(bing)原感(gan)染情况进行(xing)(xing)评(ping)估，如对(dui)清洗胚胎的溶液进行(xing)(xing)Q-PCR分析，确(que)认(ren)病(bing)毒(du)(du)含量；②净(jing)(jing)化(hua)(hua)时，净(jing)(jing)化(hua)(hua)品(pin)系(xi)与SPF野生雌鼠(shu)交配获取胚胎，降低病(bing)毒(du)(du)通过(guo)透明(ming)带进入胚胎的概率；③净(jing)(jing)化(hua)(hua)后，对(dui)哨兵鼠(shu)或净(jing)(jing)化(hua)(hua)大小鼠(shu)进行(xing)(xing)微生物检测确(que)认(ren)病(bing)原是否(fou)净(jing)(jing)化(hua)(hua)掉。由于从(cong)微生物感(gan)染到检测出(chu)来有一定的潜(qian)伏期，因(yin)而应根据具体的情况制定相应的策略(lve)。
常用(yong)(yong)(yong)的(de)(de)净(jing)(jing)(jing)化(hua)标准(zhun)有GB-SPF、FELASA、VAF/PLUS®和VAF/ELITE®等(deng)。检(jian)测的(de)(de)微生(sheng)物项目越(yue)多(duo)，产生(sheng)的(de)(de)检(jian)测费(fei)用(yong)(yong)(yong)也(ye)(ye)会越(yue)多(duo)。但是(shi)对(dui)(dui)于(yu)特定研(yan)究而言，也(ye)(ye)不(bu)是(shi)检(jian)测的(de)(de)项目越(yue)多(duo)越(yue)好，应(ying)根(gen)据实际的(de)(de)实验要求(qiu)(qiu)选择(ze)相应(ying)的(de)(de)标准(zhun)。一般选择(ze)的(de)(de)原则(ze)是(shi)：免(mian)疫缺(que)陷(xian)动(dong)物需(xu)要采用(yong)(yong)(yong)隔(ge)离器(qi)净(jing)(jing)(jing)化(hua)（排(pai)除环(huan)境菌）；非免(mian)疫缺(que)陷(xian)动(dong)物采用(yong)(yong)(yong)IVC净(jing)(jing)(jing)化(hua)即可（一般不(bu)需(xu)要排(pai)除环(huan)境菌）。IVC净(jing)(jing)(jing)化(hua)的(de)(de)代(dai)孕母(mu)鼠(shu)来自于(yu)屏障设(she)施，隔(ge)离器(qi)净(jing)(jing)(jing)化(hua)代(dai)孕母(mu)鼠(shu)来自于(yu)隔(ge)离器(qi)，后(hou)者(zhe)购鼠(shu)费(fei)用(yong)(yong)(yong)和饲养费(fei)用(yong)(yong)(yong)较高，特别(bie)是(shi)对(dui)(dui)于(yu)特殊品系，1个品系就需(xu)要使用(yong)(yong)(yong)1个隔(ge)离器(qi)3~4个月时(shi)间(jian)。我们可根(gen)据客户需(xu)求(qiu)(qiu)增加检(jian)测项目，费(fei)用(yong)(yong)(yong)根(gen)据检(jian)测项目增减。
通常(chang)情(qing)况下获得(de)符合健康标准的动(dong)物模型，就可以排除微生物的干扰，进行扩繁或开始(shi)正式的实(shi)验。
参考文(wen)献：
[1] Risks of transmissible diseases in relation to embryo transfer. Reprod. Nutr. Dev. 41 (2001) 439–450
[2] Embryo Transfer Rederivation of C.B-17/Icr-Prkdcscid Mice Experimentally Infected with Mouse Parvovirus 1. Comparative Medicine. Vol 58, No 4 August 2008 Pages 353–359
[3] Rederivation by Embryo Transfer in Strains of Laboratory Mice and Rats. Russian Journal of Genetics: Applied Research. 2013, Vol. 3, No. 4, pp. 305–315
[4] www.jax.org/jaxmice/health Aligning Health Surveillance and Risk in Embryo Transfer, Embryo wash testing.
