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无需跑胶，无需转膜！比Western Blot更便捷、准确的Simple Western来啦！
什么是Simple Western？
它的工作原理是什么？
采(cai)用微量样(yang)品(pin)管，以一根(gen)毛细管作(zuo)为载体，结合(he)专利的(de)(de)内涂层技术，可(ke)以实现在(zai)同(tong)一样(yang)品(pin)管中完成样(yang)品(pin)的(de)(de)上样(yang)、分(fen)离、固(gu)定、免疫放大和(he)化学检测(ce)，并(bing)自动进行数(shu)据分(fen)析，整个过程无需人(ren)工干预， 可(ke)有效提高(gao)检测(ce)结果的(de)(de)准确性(xing)(xing)和(he)可(ke)重复性(xing)(xing)。
Simple Western的作用是什么？
与传统(tong)western blot 一致，都能够检(jian)测蛋(dan)白表达量。
Western Blot中文一般称(cheng)为蛋白质(zhi)印(yin)迹(ji)。它是(shi)分(fen)子(zi)生物学(xue)、生物化学(xue)和(he)免疫遗(yi)传学(xue)中常(chang)用的(de)(de)(de)一种实验方法(fa)。其基本原理(li)是(shi)通过(guo)特异(yi)性(xing)抗体对凝胶电泳(yong)处理(li)过(guo)的(de)(de)(de)细胞(bao)或(huo)生物组(zu)(zu)织样品进行(xing)着(zhe)(zhe)色。通过(guo)分(fen)析着(zhe)(zhe)色的(de)(de)(de)位置和(he)着(zhe)(zhe)色深(shen)度获得特定蛋白质(zhi)在(zai)所(suo)分(fen)析的(de)(de)(de)细胞(bao)或(huo)组(zu)(zu)织中的(de)(de)(de)表(biao)达(da)情况(kuang)的(de)(de)(de)信息(xi)。
与传统western blot相比，
Simple Western有哪些优点？
实验流程标准化、自动化
Simple Western 技术可实现所有检测步骤的自动化，包(bao)括蛋白分(fen)离、固定、免疫印迹、洗(xi)涤、检测及数据(ju)分(fen)析等。可避免传统方法因实验步骤繁多、检测流程(cheng)较长而最常导致的结果(guo)重(zhong)复性差(cha)问题。
上样量小于传统western blot，节约珍贵样品
由于采用了毛细管电泳微缩技术，单个样品上样体积只需 3~5 μL，浓度 0.1~4 μg/μL，因此可尝试数目有限的流式分选细胞、干细胞、珍稀的临床组织等等，而传统 WB 往往需要 20~100 μg 总蛋白。因此，上述珍稀样品往往不足以进行蛋白水平的实验，导致中心法则证据不完整。
蛋白分子量检测范围宽
2~440 kDa；由于(yu)蛋白固定机理与(yu)传统 WB 不(bu)(bu)同，因此 Simple Western 可检测高达几(ji)百 KDa 的(de)大(da)分(fen)子量蛋白，不(bu)(bu)需再摸索任何转(zhuan)(zhuan)膜(mo)条件；而(er)在传统 WB 操作中，大(da)分(fen)子量蛋白转(zhuan)(zhuan)膜(mo)效率极其低下，甚至完全无法转(zhuan)(zhuan)印。
数据分析标准化、自动化
软件将自(zi)动给(ji)出蛋白的表(biao)达丰(feng)度等数(shu)字(zi)信息，不(bu)需进行(xing)人工灰(hui)度分析， 数(shu)据(ju)(ju)分析不(bu)受(shou)传统 WB 条带形状、背景信号等干(gan)扰，避(bi)免(mian)主(zhu)观倾向，更易被杂志认可(ke)；数(shu)字(zi)化定(ding)量(liang)数(shu)据(ju)(ju)亦可(ke)直接方便(bian)进行(xing)条形图绘制、T 检验、方差分析等统计实现。
条带图片漂亮规则，更易发表
Simple Western 技术将底层物理发光信号光斑转换成正态分布峰图，进而根据峰图输出规则美观的条带。传(chuan)统 WB 中经常出现的哑铃条(tiao)带(dai)、微笑条(tiao)带(dai)、过曝空(kong)斑、背景(jing)噪点(dian)等问题(ti)，这不仅(jin)影响条(tiao)带(dai)美观(guan)度，在条(tiao)带(dai)圈选定(ding)量、背景(jing)扣(kou)除时也将引入很大的偏差，为了(le)得到(dao)一张可发表的实(shi)(shi)验(yan)图片， 往(wang)往(wang)需要(yao)进(jin)行 n 多次重复(fu)实(shi)(shi)验(yan)。Simple Western 技术不仅(jin)保留了(le)生(sheng)物学意义上的表达关系，条(tiao)带(dai)呈现形式也更加赏心悦目，结果更易被杂志(zhi)接(jie)收。
样本通道完全独立，样本通道可自由组合、自由排列
各样本通道完全独立，在同一轮检测实验中，每个样本通道中可以各自检测不同种类的蛋白质，即每个样本通道中均可以各自使用不同抗体孵育，各样本通道间互不干扰；每根毛细管对应一个泳道，由于毛细管彼此独立，因此获得原始实验数据之后，可进一步将不同泳道进行排列组合，从不同角度阐释实验数据，一次实验可获得多张实验图片，从而避免了重复实验。
利用该仪器(qi)获得(de)的数(shu)据已经(jing)在(zai)多(duo)个期(qi)刊发表 (Boyer et al. 2018; Xu et al. 2022)。
做Simple Western 送样有哪些要求吗？
组织 (>100 mg)：取(qu)样(yang)后样(yang)品(pin)立即(ji)在液氮(dan)中速冻5min，放置在-80℃保存，送样(yang)时(shi)请在干冰中运输(shu)，如果市内可(ke)以使用(yong)冰袋运输(shu)；
蛋白(bai)质溶液: 请在干冰中运输；
细胞 (>106): 请(qing)用冰袋维(wei)持在(zai)4℃运输。
